分离液厂家

  1、不同浓度(密度)percoll分离液的制备: 先用9份percoll分离液与1份8.5%nacl或1.5mpbs混合达到生理性渗透压,然后用生理溶液
   1、不同浓度(密度)percoll分离液的制备: 先用9份percoll分离液与1份8.5% nacl或1.5mpbs混合达到生理性渗透压,然后用生理溶液(0.85% nacl或0.15m pbs)稀释到所需浓度。

  2、不连续密度梯度percoll层的制备: 先将试管壁用牛血清湿润,除去多余血清,这种预处理可使逐层叠加的percoll液平稳沿管壁流下,使形成满意的界面。在制备过程中一般用长针头从高密度向低密度逐层放置,有时相邻两层percoll比重相差不大时,可将percoll液放入中,小针头斜面紧贴管壁,任其自然慢慢流下。

  3、装样:样品体积和细胞浓度根据不同细胞而异,一般加样体积不宜过大,细胞浓度也不可过高,否则会影响细胞的分离和回收。

  4、离心:一般采用离心力为400g,时间20~25min。由于多层percoll之间密度差别不大,因此离心机加速、降速时要慢,要平稳。

  5、取样:当所要分离的细胞绝大部分在两层的界面时,可逐层去除percoll液后收集界位的细胞;有时大部分细胞位于percoll层中,则需要逐层收集。收获含有percoll液的细胞经2次洗涤后可供培养或检测用。

  适合分离细胞,亚细胞成分和大(>70s),渗透压均匀,粘度低,可调生理离子强度和ph,分离条件温和,对细胞性,可以灭菌消毒。

  percoll分离液是一种经过处理过的硅胶颗粒,经过高速离心后可形成连续密度梯度,由于percoll扩散常数低,所形成的梯度十分稳定。percoll分离液采用预先形成的密度梯度时可在低离心力(200~1000g)于数分数十分钟内达到满意的细胞分离结果。此外,percoll分离液透生物膜,对细胞,因此广泛用于分离细胞、亚细胞成分,还可将受损细胞及其碎片与完好的分离。percoll常用于分离和传话植物原生质体、核、叶绿体、和线粒体。

  percoll细胞分离液

  percoll渗透性低、透细胞、密度高、,是目前较理想的介质。percoll密度梯度离心已被多次成功地用于动物细胞及其细胞器的分离,纯化了包括人***细胞、***细胞、红血球细胞、白血球细胞、淋巴细胞、肝细胞等在内的十余种动物细胞。

  1、不同浓度(密度)percoll分离液的制备: 先用9份percoll分离液与1份8.5% nacl混合达到生理性渗透压,然后用生理溶液(0.85% nacl)稀释到所需浓度。

  2、不连续密度梯度percoll层的制备: 先将试管壁用牛血清湿润,除去多余血清,这种预处理可使逐层叠加的percoll液平稳沿管壁流下,使形成满意的界面。在制备过程中一般用长针头***从高密度向低密度逐层放置,有时相邻两层percoll比重相差不大时,可将percoll液放入***中,小针头斜面紧贴管壁,任其自然慢慢流下。

  3、装样:样品体积和细胞浓度根据不同细胞而异,一般加样体积不宜过大,细胞浓度也不可过高,否则会影响细胞的分离和回收。

  4、离心:一般采用离心力为400g,时间20~25min。由于多层percoll之间密度差别不大,因此离心机加速、降速时要慢,要平稳。

  5、取样:当所要分离的细胞绝大部分在两层的界面时,可逐层去除percoll液后收集界位的细胞;有时大部分细胞位于percoll层中,则需要逐层收集。收获含有percoll液的细胞经2次洗涤后可供培养或检测用。

  优点:

  percoll渗透性低、透细胞、密度高、是目前较理想的介质。percoll密度梯度离心已被多次成功地用于动物细胞及其细胞器的分离,纯化了包括人红血球细胞、白血球细胞、淋巴细胞、肝细胞等在内的十余种动物细胞。

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